Curso de 3 seminarios sobre citometría de flujo multicolor
PROGRAMA:
En el primero de los seminarios podremos conocer:
• Que es la citometría, en que se basa y como funciona un citómetro de flujo
• Que estudios podemos hacer y en que campos es útil la citometría.
• Que información proporciona un citómetro, en que unidades y como se clasifica en gráficos
• Que son los anticuerpos y porque se conjugan a fluorocromos
• Que es la fluorescencia y que los fluorocromos
• Que fluorocromos se utilizan en citometría de flujo. Fluorocromos clásicos y los brillantes de nueva generación
En el segundo de los seminarios (sala de Grados del edificio LAIB para martes 5/12), podremos conocer:
• Conocer el instrumento y su optimización. Fortessa X20
• Seleccionar los marcadores que definen un experimento. Estrategia, marcadores y gráficos.
• Seleccionar los fluorocromos más brillantes.
• Relación brillo y expresión del antígeno
• Minimizar el solapamiento de espectros.
• Ejemplo de panel. Poblaciones linfocitarias.
En el tercero y último de los seminarios (sala de Grados del edificio LAIB para martes 12/12) , podremos conoce
• Calidad de los datos.
• Background. Marcado inespecífico
• Background. Autofluorescencia
• Background y dispersion. Solapamiento espectral.
• Controles del experimento.
• Control de compensación.
• Control de gate. FMO
• Flujo de trabajo en experimentos de citometria.
• Caracterizar los PMTs. Voltaje óptimo
• Ajustes empíricos en nuestra aplicación.
• Ensayos puntuales o a largo plazo.
• Cambio de voltaje Vs ajustes en nuestra aplicación.
• Estandarización entre equipos y laboratorios.